二氧化碳培養箱是通過對周圍環境條件的控制制造出一個能使細胞/組織更好地生長的環境，條件控制的結果就會形成一個穩定的條件：如恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、穩定的溫度（37°C）、較高的相對濕度（95％）、穩定的CO2水平（5％），這就是為什么上述領域的研究員如此熱衷于使用方便穩定可靠的二氧化碳培養箱。
二氧化碳培養箱一般使用的壓力都不會很高，培養箱都很嬌貴的，所以一定要先調好減壓閥出口的壓力后再連接二氧化碳培養箱。二氧化碳減壓閥裝在鋼瓶上面后，逆時針打開鋼瓶總開關，減壓閥右側表顯示鋼瓶內壓力，觀察高壓表讀數，記錄高壓瓶內中的二氧化碳壓力，壓力很低表示二氧化碳量少，需重新充入二氧化碳，壓力正常后，將減壓閥出廠配置的調節手輪插入減壓閥正面凸出凹洞處，順時針緩慢轉動減壓閥調節螺桿，使其壓縮主彈簧將活門打開，減壓閥左側表顯示出氣壓力，這樣進口的高壓氣體由高壓室經節流減壓后進入低壓室，并經出口通往CO2培養箱。一般情況下，二氧化碳培養箱需要的壓力在0.03Mpa – 0.06Mpa范圍內，也有用到0.1Mpa的，需要根據實際情況而定。仔細檢查連接部位是否漏氣，將肥皂液涂到連接處進行檢查，如有氣泡則調節連接，確認不漏氣后進行實驗。使用完后，先順時針關閉鋼瓶總開關，再逆時針旋松減壓閥。
然而，隨著技術的進步，二氧化碳培養箱的功能和運作都變得越來越、可靠和方便。如今，二氧化碳培養箱已成為實驗室普遍使用的常規儀器之一，已廣泛應用于醫學、免疫學、遺傳學、微生物、農業科學、藥物學的研究和生產。